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| 本書は医学生物学領域で電子顕微鏡を用いて研究、診断を行う全ての技術者、研究者、医師を対象にした、電子顕微鏡技術書である。 専門分野で活躍する多くの著名な技術者、研究者による執筆であるために、実際の電子顕微鏡操作、試料作製の方法、手順が明解に記載されている。また、写真、図、フローチャートをふんだんに用いて「よくわかる」技術書にまとめられている。 |
目次
- 1．透過電子顕微鏡の試料作製法
- 1．1 一般的な試料作製法（堀田康明）
- a．固定剤とその利用法
- b．脱水と置換の操作
- c．樹脂
- 1．2 動物細胞の試料作製法
- （伊藤洋二、宮澤七郎、根本典子、朴杓允）
- a．標準的な試料作製法
- b．各ステップにおける留意点と実際
- c．迅速試料作製法
- d．試料作製に注意を要する組織や構造
- e．病理組織の保存法と固定液
- f．パラフィンからのもどし電顕法
- g．器具・試薬の取扱いと注意事項
- h．電顕的検索が保険請求の対象となる病理組織と疾患
- 1．3 植物細胞の試料作製法（朴杓允）
- a．植物の電顕試料作製法
- b．固定前の準備
- c．各種の固定法
- 1．4 微生物の試料作製法（朴杓允）
- 1．5 硬組織の試料作製（江尻真一、小溝英治）
- 1．6 単層培養細胞、浮遊細胞、生体高分子試料（勝本哲央）
- a．単層培養細胞の試料作製法
- b．浮遊細胞、生体高分子試料の試料作製法
- 1．7 マイクロウェーブによる試料作製法（宮澤七郎）
- 1．8 オートティッシュプロセッサ（宮澤七郎）
- 2．超薄切片法
- 2．1 超薄切片法総論（高塩 稔）
- a．超ミクロトームの種類と原理
- b．超ミクロトーム室の条件
- c．超薄切片作製の実際
- d．超薄切のトラブルとその原因
- 2．2 ガラスナイフ作製（与那覇朝英）
- a．手割り法
- b．ナイフ作製機の特徴と種類
- 2．3 ダイヤモンドナイフの取扱い法（宮澤七郎）
- a．ダイヤモンドナイフの購入
- b．刃角度および取付角度の測定方法
- c．取扱方法と注意点
- d．クリーニング方法
- 3．電子染色（吉濱 勲）
- 3．1 厚切り切片の光顕染色法
- a．非脱樹脂染色法
- b．脱樹脂法
- c．非脱樹脂染色法
- 3．2 準超薄切片法
- 3．3 準超薄切片のポジティブ染色法
- a．非特異的切片染色法
- b．特異的切片染色法
- 3．4 自動染色機
- 3．5 ネガティブ染色法
- 4．走査電子顕微鏡の試料作製法（島田達生）
- 4．1 標準SEM試料観察法
- a．試料の摘出と切り出し
- b．洗浄
- c．固定
- d．導電染色
- e．脱水
- f．置換
- g．乾燥
- h．試料台への載物
- i．金属膜コーティング
- 4．2 観察面剖出
- a．自由表面の洗浄
- b．切断法
- c．剥離
- d．割断法
- e．化学的消化法
- f．染色体の割出
- g．分離ミトコンドリアの観察
- 4．3 鋳型法
- 4．4 遊離細胞の観察
- 4．5 培養細胞の観察
- 4．6 反射電子像観察法
- 5．支持膜と真空蒸着（北重夫）
- 5．1 グリッド
- 5．2 支持膜
- 5．3 真空蒸着
- 5．4 シャドウイング
- 5．5 レプリカ法
- 6．凍結技法（鈴木季直）
- 6．l 急速凍結法
- a．凍結の原理
- b．種々の急速凍結法
- c．凍結法の検討
- 6．2 凍結乾燥法
- 6．3 凍結置換法
- 6．4 凍結レプリカ法
- 6．5 凍結超薄切片法
- 7．組織化学
- 7．1 酵素組織化学（和泉伸一）
- a．酵素組織化学の原理
- b．電顕酵素組織化学の実際
- 7．2 レクチンその他の組織化学（川上速人）
- 7．3 免疫組織化学（小松連至）
- 7．4 pre embedding法（小松遵至）
- 7．5 凍結超薄切片法の応用（高田部昭）
- 7．6 post embedding法（根本典子、宮澤七郎）
- a．試料作製法
- b．樹脂包理法
- c．金コロイド免疫電顕法
- d．免疫染色の手技
- e．OsO4固定試料の免疫反応
- 8．オートラジオグラフィー（栗原孝行）
- a．電顕ARGの原理
- b．電顕ARGに使用する放射性同位元素
- c．RI物質の投与
- d．電顕試料作製
- e．グリッドおよび切片処理
- f．原子核研究用乳剤の種類
- g．乳剤塗布法
- h．露出
- i．現像
- j．染色
- k．電顕ARG像の観察上の注意
- l．1μm切片の光顕ARG法
- 9．写真処理（宮澤六郎、宮澤七郎）
- a．フィルムの特性
- b．暗室作業
- 10．透過電子顕微鏡の原理と構造（花市敬正）
- a．電子顕微鏡の基礎
- b．電子顕微鏡の構成とその役割
- c．電子顕微鏡の操作
- d．電子顕微鏡の保守
- e．電子線回折
- f．TEMにおける立体観察法
- 11．走査電子顕微鏡の原理と構造（村中祥悟）
- a．走査電子顕微鏡の原理
- b．走査電子顕微鏡の構造
- c．SEM操作の手順と分解能・像質への影響
- d．反射電子像
- e．低真空試料室を持つ走査電子顕微鏡
- f．走査電子顕微鏡における立体観察
- g．保守
- 12．分析電子顕微鏡（宮澤七郎）
- a．電子線マイクロプローブX線微小分析
- b．EPMA分析法
- c．X線スペクトルの見方
- d．測定条件の決め万
- e．バルク試料と薄膜試料における分析領域の違い
- f．試料作製上の注意
- 13．電子顕微鏡像の画像処理（村中祥悟、朴杓允）
- a．像質向上処理
- c．形態計測
- d．画像解析
- e．コンピュータグラフィックスによる
三次元再構築像の作製法
- 14．良い電子顕微鏡像を得るためのテクニック
- 14．1 良い透過電子顕微鏡像の撮り方
（会田嵯武郎） - 14．2 良い走査電子顕微鏡像の撮り方（松本健次）
- 14．3 試料作製・切削・染色法
- a．固定と採取の問題
（伊藤洋二、宮澤七郎、村中祥悟、朴杓允） - b．樹脂の問題（朴杓允）
- c．切削の問題（高塩 稔、朴杓允）
- d．染色の問題（朴杓允、根本典子、小松遵至）
- e．乾燥の問題（村中祥悟）
- 15．基本的な細胞構造
- 15．1 動物細胞の基本構造（森 吉臣）
- 15．2 植物細胞の基本構造（朴杓允）
付録1 電顕試薬の配合表
付録2 電顕で使用する試薬の危険性
付録3 単位換算表・スケール表
索引
執筆者一覧（五十音順敬称略）
会田嵯武朗
日本電子（株）電子光学機器技術本部
和泉伸一
長崎大学医学部解剖学第三講座
伊藤洋二
神奈川県総合リハビリテーションセンター検査部
江尻貞一
新潟大学歯学部口腔解剖学第一請座
小澤英浩
新潟大学歯学部口腔解剖学第一講座
勝本哲央
鳥取大学医学部中央電子顕微鏡室
川上速人
杏林大学医学部解剖学教室
北 重夫
東京女子医科大学総合研究所電子顕微鏡室
栗原孝行
金沢医科大学総合医学研究所
小松遵至（*）
東海大学医学部共同利用研究室細胞生物部門
島田達生
大分医科大学解剖学教室
鈴木季直
帝京大学医学部第二生理学教室
高塩 稔
岩手医科大学電子顕微鏡室
高田邦昭
杏林大学医学部解剖学教室
根本典子（*）
北里大学医学部電子顕微鏡センター
花市敬正
名古屋大学医学部教育研究機器センター
平野 寛（**）
杏林大学医学部解剖学教室
朴杓 允（*）
帝京大学医学部整形外科学教室
堀田康明
名古屋市立大学医学部第一解剖学教室
松本健次
日製産業（株）科学機器センター
宮澤七郎（**）
北里大学医学部電子顕微鏡センター
宮澤六郎
東京大学医学部附属病院検査部フォトセンター
村中祥悟（*）
浜松医科大学電子顕微鏡室
森 吉臣
独協医科大学越谷病院病理部
吉濱 勲
東京医科大学電子顕微鏡研究室
与那覇朝英
聖マリアンナ医科大学中央電子顕微鏡研究施設
（**監修者、*編集担当者、五十音順）